细胞支原体检测

                      支原体检测：与细胞STR鉴定同等重要！

      近些年，在各方努力下，细胞STR鉴定逐渐被重视。针对培养的细胞系，许多实验室都开始定期进行STR鉴定。然而细胞的周期性支原体检测仍旧被忽略，更多的实验室都是在怀疑细胞被支原体污染的时候才会进行支原体检测，而此时细胞房的所有细胞可能都已不同程度的被支原体污染！

      支原体（Mycoplasma）又称霉形体，是目前发现的最小、最简单的原核生物。在细胞培养过程中，约有30%-60%的细胞培养物存在支原体污染。由于支原体体积非常小，直径仅为0.1-0.3μm，加之形态多变，有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态，因此实验室和生物制品工厂在细胞培养过程中很容易遭受支原体污染。

(支原体形态)

      支原体污染细胞后，不仅会影响细胞的生长状态及形态，也会影响其正常代谢和功能，如细胞的蛋白质、DNA、RNA合成发生障碍，细胞信号传递受到影响，染色体发生异常等。若实验结果是在支原体阳性细胞中所得，那实验数据必定会影响研究结论的有效性。

(细胞被支原体污染)

      更重要的是，一些主流SCI期刊（如IJC）以及细胞相关组织/机构（如ICLAC）都已经对细胞的支原体检测做出了明确要求，不管在日常细胞培养中还是文章投稿前，进行细胞STR鉴定的同时也应该进行支原体检测。

      ICLAC的指导文件《Making Cell Line Authentication Part of Everyday Cell Culture Practice》中规定：“所有细胞系应当进行常见微生物污染的检测，如支原体检测。还需要进行病毒污染检测，这具体取决于细胞株类型和自己具体的应用。”

(ICLAC相关指南)

      IJC的《Author Guidelines》中规定：“（投稿时）需提供一份声明，证明所有实验都是使用的无支原体污染的细胞”。另外，IJC编辑部发表的文章中也建议：“如果细胞系是从二次来源(如从事基础研究的同行)获得的，则应对细胞系进行无抗生素的隔离培养，直到通过STR分型确认了其细胞身份；同时，还应对细胞系进行无菌检测及支原体检测。”

(IJC-Author Guidelines)

(Nicole Y Souren et al., 2022)

      因此，与定期STR鉴定一样，周期性的支原体检测也应成为实验室日常细胞培养工作中的重要一环！

      目前，支原体检测的主流方法为PCR法。苏州鉴达的支原体检测试剂盒便是以PCR法为基础的试剂盒，该试剂盒可检测528种支原体，保证了高特异性的同时又优化了PCR法中存在的广谱性差的问题。

参考文献：

      1.www.jsdna.org/cell

      2.http://www.jsdna.org/mobile/information/xuz

      3.Making Cell Line Authentication Part of Everyday Cell Culture Practice. ICLAC.

      4.Nicole Y Souren et al., Cell line authentication: a necessity for reproducible biomedical research. EMBO J.2022 Jul 18;41(14):e111307.

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