肺炎支原体分离培养及检测

肺炎支原体（M.pneumonia，MP）是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间。肺炎支原体常引起上呼吸道感染，对儿童和老年人危害尤甚。早期，对MP的诊断以体外分离培养为主，后来发展为以免疫检测为主，近年来，又出现了PCR检测等新的检测手段。但不管怎样，分离培养仍然是MP感染诊断的重要参照和比对方法。因而，分离培养对肺炎支原体的检测诊断具有非常重要的意义。

肺炎支原体对营养要求苛刻，需要特殊的培养基才能生长。另外，其培养需要较高的培养技巧。因而，长期以来，肺炎支原体的分离培养在国内都是一个较大的难题。我们研究发现，造成此种现象的原因主要有：

1、国内缺乏适宜的肺炎支原体培养基，市面上的MP培养基质量普遍较差，培养基中的营养成分有些过量，有些不足，有些则缺乏，《中国药典》也没有明确规定MP培养基各种成分的含量和搭配，致使MP无法得到全面甚至是必需的营养。

2、国内尚未具备成熟的肺炎支原体培养技术，缺乏必要的培养技巧，MP的培养需要较高的培养技巧，此技巧只有具备较长时间MP培养经验的人才会拥有，而国内进行MP培养的人大多只培养过细菌和病毒，根本无MP培养经验。

3、部分文献误导，有些MP研究的文献将培养部分描述的过于简单，有些描述的明显错误，导致参考者误入培养歧途。我们曾参考过类似的国内文献，也走了不少弯路。

据了解，目前国内可提供肺炎支原体分离培养的有国内的百代生物，其海归研发团队经一年多的摸索，反复实验，已掌握了肺炎支原体的培养要点，不仅可提供合格的肺炎支原体培养基，还可提供综合液体培养服务、平板分离、生化鉴定和免疫学鉴定服务。不仅如此，针对部分研究者的特殊需求，还可提供定量和计数服务。研究者可自行摸索肺炎支原体的分离培养也可寻找专业的公司来完成。

图1 液体培养基从咽拭子中分离培养肺炎支原体

图2 琼脂糖培养基分离的肺炎支原体菌落，呈典型的“油煎蛋”样

图3 葡萄糖发酵实验培养基颜色变化

图4 精氨酸培养基颜色变化。

图5 胶体金培养分离肺炎支原体的检测结果